請教：RT-PCR的方法與ELISE、放射免疫法相比有何優劣？請教：RT-PCR的方法與ELISE、放射免疫法相比有何優劣？

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RT-PCR法:首先將細胞因子產生細胞的RNA提取出來，再經逆轉錄合成cDNA，以cDNA為模板，在細胞因子引物的引導下，進行PCR擴增。這種技術是迄今最敏感的細胞因子檢測技術，而且可以直觀的反應淋巴細胞產生細胞因子的能力。缺點是操作較為繁瑣，測定結果只能代表細胞因子基因的表達，而不能代表活性細胞因子的水平，并且不容易對細胞因子表達水平進行定量。ELISA法：大多使用夾心法檢測。要有抗同一細胞因子不同表位的兩個抗體，一個抗體用于包被作捕捉抗體用;另一個抗體分子作檢測用,其分子上標記生物素,使生物素分子與酶標記的親和素分子結合,一般用單抗體包被抗體,用多抗或幾個單抗混合起來作檢測抗體,這樣可以提高檢測的靈敏度。ELISA法的優點是特異、方便、易標準化和批量化,很適合臨床應用。其缺點是所提生供的是免疫活性信息而不是細胞因子生物活性信息，除此之外,血清與體液中的嗜異性抗體,抗類風濕因子等自身抗體也可干擾測定結果，而且不能反應細胞內的細胞因子水平。放射免疫法與夾心ELISA法基本相同，而且夾心ELISA法由于生物素和酶標親和素的級聯放大，其靈敏程度達到了放免的水平。 。